Genteknologi

PCR – Polymerase Chain Reaction

Alexander Ibsen, Partner i IVB, Master i skat, LL.M, cand.merc.(jur.)

Claus Gudum Faaborg

januar 30, 2025
PCR – Polymerase Chain Reaction

Polymerase Chain Reaction (PCR) er en revolutionerende teknologi inden for molekylærbiologi, der muliggør hurtig og præcis mangedobling af specifikke DNA-sekvenser.

Metoden blev udviklet i 1980’erne af Kary Mullis og har siden haft en enorm indflydelse på forsknings- og diagnostikområderne. Ved at udnytte en cyklisk proces af opvarmning og afkøling kan PCR kopiere en et bestemt udsnit af et stykke DNA millioner af gange, hvilket gør det muligt at analysere selv små mængder genetisk materiale. Dette har åbnet op for en bred vifte af anvendelser, herunder genetisk forskning, retsmedicinsk analyse, sygdomsdiagnostik og kloning.

Processen forklares i explainer videoen:

PCR forklaret

Resume af PCR:Polymerasekædereaktion (PCR) er en teknik, der bruges til at kopiere DNA. Processen består af tre hovedtrin:

  1. Denaturering: Prøven opvarmes til 94-95°C, hvilket får de dobbelte DNA-strenge til at adskille sig til enkeltstrenge.
  2. Annealing: Temperaturen sænkes til 50-65°C, så korte DNA-primere kan binde sig til de enkeltstrengede DNA-sekvenser.
  3. Forlængelse: Temperaturen hæves til 72°C, hvor enzymet Taq-polymerase syntetiserer nye DNA-strenge ved at tilføje nukleotider til primerne.

Disse trin gentages 20-40 gange for at producere millioner af kopier af den ønskede DNA-sekvens

Indholdsfortegnelse

Real-time qPCR

Kvantitativ PCR (qPCR) er den metode der bruges til Corona PCR tests. qPCR er også kendt som real-time PCR, er en avanceret molekylærbiologisk teknik, der anvendes til at kvantificere mængden af en specifik DNA-sekvens i en prøve. Denne metode kombinerer traditionel PCR med fluorescensbaseret detektion, hvilket gør det muligt at overvåge dannelsen af DNA i realtid.

Sådan fungerer qPCR

  1. Fluorescensmærkning: Under qPCR tilsættes fluorescerende markører til reaktionsblandingen. Disse markører binder til det dobbeltstrengede DNA, der dannes under PCR-processen.
  2. Termisk cykling: Ligesom i traditionel PCR gennemgår prøven gentagne cyklusser af opvarmning og afkøling for at denaturere DNA, binde primere og forlænge DNA-strengene.
  3. Real-time detektion: Under hver cyklus måles fluorescensintensiteten, som stiger i takt med mængden af amplificeret DNA. Dette gør det muligt at kvantificere den oprindelige mængde DNA i prøven ved at analysere, hvor hurtigt fluorescenssignalet når en bestemt tærskelværdi.

Anvendelser af qPCR

qPCR bruges bredt inden for forskellige områder af biologi og medicin, herunder:

  • Genekspressionsanalyse: Bestemmelse af mRNA-niveauer for at studere genaktivitet.
  • Diagnostik: Påvisning og kvantificering af patogener såsom vira (Covid19) og bakterier.
  • Genomisk forskning: Påvisning af mutationer og dannelse af stamtræ.

Fordele ved qPCR

  • Høj følsomhed og specificitet: qPCR kan detektere og kvantificere meget små mængder DNA.
  • Hurtig og præcis: Resultater kan opnås hurtigt og med høj nøjagtighed.

Relaterede videoer og guides

Udforsk også..

Bliv opdateret

Følg med og bliv klogere, når jeg udgiver nye videoer på YouTube

Ibsen Venning Brixius, skatterådgivning og køberådgivning